技術紹介TECHNOLOGY

培養Microorganism & Cell Culture

技術概要

微生物培養
一般微生物(大腸菌・放線菌・カビ・酵母など)や遺伝子組換え体(大腸菌・酵母など)の培養を受託致します。さらに培養のみならず、得意とする分離精製技術を駆使して目的とするタンパク質、二次代謝産物や生変換産物をmg~kgオーダーで提供します。お客様から培地や培養方法のご提示が無い場合でも、神戸天然物化学にて最適化を行い、最大2000Lまでスケールアップすることができます。培養から菌体除去までの作業エリアはP1レベルでの管理で遺伝子組換え体を扱うことができ、GILSP対応も可能です。培養後の培地や菌体などは3000L殺菌タンクで処理後焼却しており、環境への配慮も万全です。また、培養液から溶媒を用いた抽出にも対応します。
細胞培養
抗体やタンパク質などの生理活性物質を産生するCHO細胞、HEK293細胞あるいは昆虫細胞などの培養を行います。お客様に代わり神戸天然物化学で発現系を構築することもできます。フラスコレベルから25L(培地量)までの培養が可能で、ディスポーザブルバック等を使用し、交差汚染の低減を図っています。目的とする抗体やタンパク質の分離・精製(遠心分離、限外ろ過、クロマトカラム等)を行い、溶液や凍結乾燥品として納品します。

実績

  • 放線菌、カビ、酵母の培養
  • 遺伝子組換え体(大腸菌・酵母など)の培養
  • pH/溶存酸素/温度等の検討、流加よる高密度培養
  • 組換えタンパク質、二次代謝産物の生産
  • 微生物もしくは菌体破砕により得られた酵素を用いた物質変換(バイオコンバージョン)・培養液から各種有機溶媒を用いた目的物の抽出、遠心分離/膜分離/クロマトグラフィーによる精製

設備

製造設備
微生物培養 培養槽(2L~2000L)、遠心分離機(デュラバル式、シャープレス)フィルタープレス(1.4m²・13m²)殺菌タンク(3m³)・細胞破砕機
細胞培養 WAVE式培養装置(最大25L)・CO2インキュベーター・限外ろ過装置(~10m²)
分析設備
      電気泳動、プレートリーダー、UV-VIS、FT-NMR、MALDI-TOFMS

スケール/
ステージ

微生物培養では、フラスコレベルの培養から、培養条件の検討から~2000Lの培養槽を用いた培養まで可能です。
細胞培養では、フラスコレベルから25L(培地量)までの培養が可能で、
ディスポーザブルバック等を使用し、交差汚染の低減を図っています。
目的とする抗体やタンパク質の分離・精製(遠心分離、限外ろ過、クロマトカラム等)を行い、溶液や凍結乾燥品として納品します。

遺伝子組み換えGENETIC ENGINEERING

技術概要

微生物や動物細胞を用いて、二次代謝産物、酵素や抗体などのタンパク質、バイオコンバージョンによる有用産物を製造するための発現系を構築します。大腸菌、酵母などの微生物、およびCHO細胞、HEK293細胞あるいは昆虫細胞などの細胞の中から目的に応じた最適な宿主をご提案します。発現系の構築から、スケールアップを伴う培養や変換反応、目的物の精製までを一貫して行えるのが神戸天然物化学の強みです。ご必要な場合は目的物の構造決定も賜ります。

また神戸天然物化学では、シトクロムP450(CYP)やジオキシゲナーゼなどの酸化酵素、UDP-グルクロン酸転移酵素などの糖転移酵素の発現系について技術開発を行っております。P450については多くの細菌由来および植物由来P450遺伝子を保有し、各由来P450に対応する機能発現ベクターを構築しています。この中でも様々な細菌由来P450(クラスⅠ)を汎用的に機能発現させることができるベクターは神戸天然物化学独自のものです。このベクターは、クラスⅣの電子伝達タンパク質と様々なクラスⅠのP450とを融合タンパク質として発現させることにより、P450の機能を効率良く発揮させることができます。細菌由来P450の中には、ヒト由来や植物由来P450と同じ変換を行うものがあり代謝物の調製に有用です。神戸天然物化学では常時数十種類の細菌由来P450組換え大腸菌ライブラリーによる迅速なスクリーニング体制を整え、お客様の試験化合物に迅速に対応します。

実績

特に大腸菌や酵母などの微生物を宿主とした発現系について数多くの実績があります。

設備

製造設備
PCR、冷却遠心器、超音波破砕機、振とう培養器、培養槽(2L〜2000L)、バッグ式細胞培養装置(最大25L)
分析設備
電気泳動、プレートリーダー、UV-VIS、FT-NMR、MALDI-TOFMS

スケール/
ステージ

構築した発現系を用いたスケールアップは神戸天然物化学の得意とするところです。創薬段階でのリード化合物の創製や医薬品代謝物の調製、工程短縮を目指したバイオプロセス開発、試作、製造など、あらゆるステージにおいて神戸天然物化学の発現系を用いたバイオコンバージョンがお客様の研究開発のニーズにお応えします。